兔C-反應(yīng)蛋白（CRP）酶聯(lián)免疫試劑盒

簡要描述：產(chǎn)品名稱：兔C-反應(yīng)蛋白（CRP）酶聯(lián)免疫試劑盒
成份：酶標(biāo)板、試劑、標(biāo)準(zhǔn)品等
規(guī)格：48T/96T
保存條件：2~8℃，溫度6攝氏度，有效期6個月
服務(wù)：免費代測
精準(zhǔn)度：高

產(chǎn)品型號： LB-40628271

所屬分類：其它ELISA試劑盒

更新時間：2022-05-04

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

兔C-反應(yīng)蛋白（CRP）酶聯(lián)免疫試劑盒

規(guī)格：96T/48T

產(chǎn)品用途：科研實驗

公司服務(wù)：ELISA試劑盒免費代測

兔C-反應(yīng)蛋白（CRP）酶聯(lián)免疫試劑盒

1.標(biāo)記方法良好的酶結(jié)合物取決于兩個條件：即高效價的抗體和高活性的酶?？贵w的活性和純度對制備標(biāo)記抗體至關(guān)重要，因為特異性免疫反應(yīng)隨抗體活性和純度的增加而增強。在酶標(biāo)記過程中，抗體的活性有所降低，故需要純度高、效價高及抗原親和力強的抗體球蛋白，最好使用親和層析提純的抗體，可提高敏感性，而且可稀釋使用，減少非特異性吸附。

酶與抗體交聯(lián)，常用戊二醛法和過碘酸鹽氧化法。郭春祥建立的HRP標(biāo)記抗體的改良過碘酸鈉法簡單易行，標(biāo)記效果好，特別適用于實驗室的小批量制備。其標(biāo)記程序為：將5μg HRP溶于0.5ml蒸餾水中，加入新鮮配制的0.06 mol/L的過碘酸鈉（NaIO4）水溶液0.5ml，混勻置4℃冰箱30分鐘，取出加入0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室溫放置30分鐘后加入含5(g純化抗體的水溶液1ml，混勻并裝透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸鹽緩沖液于4℃冰箱中慢慢攪拌透析6小時（或過夜）使之結(jié)合，然后吸出， 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小時，將上述結(jié)合物混合液加入等體積飽和硫酸銨溶液，置4℃冰箱30分鐘后離心，將所得沉淀物溶于少許0.02mol/L、pH7.4PBS中，并對之透析過夜（4℃），次日離心除去不溶物，即得到酶標(biāo)抗體，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，進行測定后，冷凍干燥或低溫保存。

2.酶標(biāo)抗體標(biāo)記效果測定：測定內(nèi)容包括酶和抗體活性、結(jié)合物中酶含量和IgG含量、酶與IgG摩爾比值以及結(jié)合率。

(1) 酶與抗體的活性常用瓊脂擴散或免疫電泳法，使抗原與抗體形成沉淀線，經(jīng)PBS漂洗1天，再以蒸餾水浸泡1小時，將瓊脂凝膠片浸于酶底物溶液中著色，如果出現(xiàn)應(yīng)有的顏色反應(yīng)，再用生理鹽水浸泡，顏色仍然不褪，表示結(jié)合物既有酶的活性，也有抗體活性。良好的結(jié)合物在顯色后，瓊擴滴度應(yīng)在1:16以上。另一個測定方法是用系列稀釋的酶標(biāo)抗體直接以ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗,酶聯(lián)免疫試劑盒)方法進行方陣滴定，此法不僅可以測定標(biāo)記效果，還可以確定酶標(biāo)抗體的使用濃度。

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